Copyright ?2013-2017 中國知網(wǎng)論文查重檢測系統(tǒng)入口 All Rights Reserved. 網(wǎng)站備案號：黔ICP備19012782號-3.
這是目前新冠病毒核酸檢測最常用的方法。 但下列因素可能導致檢測結(jié)果出現(xiàn)誤差： 保存不當或未及時送檢：RNA病毒很容易降解，因此，獲得患者樣本后，需要規(guī)范地保存，并盡快進行檢測。 否則，很可能導致檢測結(jié)果不準確。 結(jié)果解讀錯誤：目前批準的檢測產(chǎn)品都是根據(jù)新型冠狀病毒基因組中開放讀碼框1a/b、包膜蛋白和核衣殼蛋白進行選擇。 但不同產(chǎn)品的檢測引物、探針設(shè)計存在不同，有單靶區(qū)段、雙靶區(qū)段、三靶區(qū)段的檢測和判讀差別。 因此，如果沒有嚴格按照不同的說明書進行判讀，有可能導致結(jié)果判斷錯誤。 2.聯(lián)合探針錨定聚合測序法 這種檢測主要是用專門的儀器檢測測序載片上DNA納米球攜帶的基因序列。 這種檢測的靈敏度高，不容易漏診，但結(jié)果也容易受多種因素的影響而不準，包括：
最常見的檢測新型冠狀病毒特異性核酸序列的方法是熒光定量PCR（聚合酶鏈式反應(yīng)）。 由于新型冠狀病毒是RNA病毒，試劑盒檢測基本都采用反轉(zhuǎn)錄加實時聚合酶鏈式反應(yīng)法（RT-PCR），擴增病原體的核酸 (RNA) ，同時通過熒光探針實時檢測擴增產(chǎn)物。 在PCR反應(yīng)體系中，包含一對特異性引物以及一個Taqman探針，該探針為一段特異性寡核苷酸序列，兩端分別標記了報告熒光基團和淬滅熒光基團。 探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；如反應(yīng)體系存在靶序列，PCR反應(yīng)時探針與模板結(jié)合，DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性將探針酶切降解，報告基團與淬滅基團分離，發(fā)出熒光。 每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子產(chǎn)生。
再次，N 基因在新冠病毒的核酸序列中保守程度不及ORF1ab,故還可能 存在少數(shù)樣本由于其他冠狀病毒等的核酸序列與其有交叉，導致N 基因擴增陽性而ORF1ab 陰性。 6、結(jié)論 綜上所述，目前新冠病毒所致疾病其病理過程及臨床病程還未完全闡明，實驗室檢測路徑未 標準化，加上其核酸檢測試劑盒研發(fā)時間緊迫，沒有足夠的評估及大樣本的臨床驗證，檢測 效果良莠不齊，故對于臨床上新冠病毒核酸檢測結(jié)果為陰性或單通道陽性的樣本均需要謹慎 對待，考慮到各環(huán)節(jié)中可能造成結(jié)果不準確的影響因素。
此外，核酸檢測可以在感染的各個時期進行檢測，但蛋白的檢測則比較有局限性，要在感染7天后或是出現(xiàn)癥狀3-4天才能比較準確的反映感染情況。 兩種檢測方法，在樣品制備、樣品類型、設(shè)備要求以及專業(yè)要求和成本上也存在著差異。